MDCK（NBL-2） 狗腎細(xì)胞 凍存細(xì)胞 復(fù)蘇細(xì)胞 耐藥株 細(xì)胞染色 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 正常細(xì)胞株 腫瘤細(xì)胞株 原代細(xì)胞 貼壁細(xì)胞 懸浮細(xì)胞 ATCC引進(jìn)細(xì)胞 轉(zhuǎn)染細(xì)胞 400多種類熱賣細(xì)胞株細(xì)胞系等您來(lái)挑選！

產(chǎn)品名稱：MDCK(NBL-2) 狗腎細(xì)胞

細(xì)胞簡(jiǎn)介：MDCK細(xì)胞為狗腎上皮細(xì)胞，來(lái)源于狗腎，中文名為狗腎上皮細(xì)胞，正常的細(xì)胞形態(tài)為上皮樣，貼壁生長(zhǎng)。

培養(yǎng)基：EMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件：37℃ 5% CO2

消化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA溶液，消化10-15min

傳化比例：1：2-1：6

換液時(shí)間：2-3天換液一次

凍存液比例：85%培養(yǎng)基，10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存

MDCK（NBL-2） 狗腎細(xì)胞 操作說(shuō)明：

懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代：直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞，1：3或1：5稀釋細(xì)胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代：吸去培養(yǎng)液，用PBS洗滌細(xì)胞一次，加入消化液，在37℃中消化約3～10分鐘，待細(xì)胞開始脫落時(shí)，倒去消化液，加入新鮮培養(yǎng)液，懸浮和吹打分散細(xì)胞。也可以待細(xì)胞*消化脫落，500×g離心5分鐘，去除消化液，用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞。1：3或1：5稀釋細(xì)胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

2）細(xì)胞株的凍存：

1． 取培養(yǎng)2～3天生長(zhǎng)旺盛的細(xì)胞，用細(xì)胞培養(yǎng)液將細(xì)胞配成2×106～2×107/ml。

2． 在1ml細(xì)胞凍存管中加入0.5ml細(xì)胞懸液，0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜（或甘油），混勻后密封。置4℃ 1小時(shí)，－20℃ 2小時(shí)，然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔夜后浸入液氮中。

3）細(xì)胞株的復(fù)蘇：復(fù)蘇時(shí)，從液氮中取出凍存管，立即置37℃水浴中融化細(xì)胞。將細(xì)胞直接加入10ml含15％小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中，置37℃ 5％CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞待細(xì)胞全部沉降后小心吸去上清液，更換新鮮的上述培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)；帖壁細(xì)胞則培養(yǎng)2～3小時(shí)，待細(xì)胞帖壁后，倒去培養(yǎng)液，更換新鮮的上述培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。也可以在加入新鮮培養(yǎng)液以后，500×g離心5分鐘，去上清液，加入新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

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