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小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)Elisa試劑盒實驗原理:
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)Elisa試劑盒酶標儀的使用過程中的一些問題:
1.閾值可疑范圍的設定 一般酶標儀閾值矩陣設定可設定陰性、可疑、陽性3個范圍。有經驗表明可疑范圍的設定要設定為臨界上下15%(也稱灰色區)為宜;同時陰性范圍下限和陽性范圍應該充分考慮到影響ELISA結果因素的存在,可疑范圍上限必須考慮到雙波長情況下出現負吸光度值和超范圍報告影響結果的可能性。“灰色區"的結果的真實性是ELISA定性測定中zui需要把握的環節,也是實驗室引起醫療糾紛的主要方面,因此必須對可疑結果進行復檢,用兩種試劑盒。
2.樣板程序文件設定 一個實驗室同一試驗可能使用不同廠家試劑盒,但不同試劑盒規定的設定對照數量、閾值判定標準等均可能不*,酶標儀所設樣板程序也不*。為了使用方便,可在樣板程序文件中用后綴加以區別。
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