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細胞名稱:HeLa 人宮頸癌細胞
別名:HeLa細胞,人宮頸癌細胞系
種屬:人
組織來源:宮頸腺癌
細胞形態:上皮細胞樣
培養條件:
培養基類型:D-MEM 培養基
FBS: 10%
抗生素:雙抗
培養條件:37℃,CO2: 5%
傳代方法:
收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態:
如果沒長滿,將培養瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮培養液,繼續培養。
如果細胞已經長滿(約80%-90%)則傳代后繼續培養。
貼壁細胞傳代方法:
1 棄去培養基,用不含鈣、鎂離子的PBS 洗1-2 次。
2 加1ml 0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細胞接觸后放入37℃培養箱內,隨時觀察細胞狀態變化,待細胞大部分變圓后加*培養基終止消化。
懸浮細胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。
1 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3,吹打細胞形成細胞懸液后,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。
2 離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內,1000rpm,
5 分鐘,去除上清,加新的培養液到離心管內,吹打細胞形成細胞懸液后,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。
一般沒有特殊說明,細胞一般是一傳二。
凍存方法:
70% *培養基,20%FBS,10%DMSO,現用現配。
儲存:液氮中長期保存。
注:
1 觀察細胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計細胞密度。
2 在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發生部分脫落,可
離心吹打后重新種入瓶中培養。
3 收到細胞后若發現培養瓶破損、細胞污染等,請在一周內與我們
。
來源:慧穎細胞實驗室
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:王