細(xì)胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無萄、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等)，使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的-種方法。不論對于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是-個(gè)*的過程，其本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺?。該技術(shù)可以由一一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié)。

　　細(xì)胞培養(yǎng)起來感覺會(huì)很簡單，但是有時(shí)候也會(huì)出現(xiàn)各種不順的問題 ，例如：污染，生長緩慢，變形，死亡率過高…..，畢竟細(xì)胞是體外培養(yǎng)的，在培養(yǎng)的時(shí)候會(huì)受到各種外界因素的影響，培養(yǎng)基、血清、孵育溫度、C02濃度等，除此之外還有抗生素……

　　一般來說細(xì)胞培養(yǎng)是不需要加抗生素，因?yàn)榕囵B(yǎng)過程必須要無菌操作。如果實(shí)驗(yàn)室污染嚴(yán)重，建議*打掃一下，擦拭消毒、熏蒸或者紫外照射殺菌。然后把細(xì)胞實(shí)驗(yàn)涉及到的試劑都做下空培，包括使用的胰酶，胎牛血清等。如果實(shí)驗(yàn)室無菌條件優(yōu)異，細(xì)胞培養(yǎng)可以不加抗生素，因?yàn)榭股氐乃幮胶投拘运椒浅＝咏Ｌ貏e是用于細(xì)胞治療的培養(yǎng)。

　　若當(dāng)心細(xì)胞感染，可以適當(dāng)添加一些抗生素預(yù)防，如果已經(jīng)有污染，建議按照以下方案添加：

　　1、常用的是青霉素、鏈霉素聯(lián)合抑制細(xì)菌，即所謂的“雙抗”，主要針對革蘭氏陽性菌、陰性菌;對于細(xì)菌的感染也可用慶大或卡那霉素;

　　2、如果真菌污染嚴(yán)重，可用兩性霉素/制霉菌素控制;

　　3、若為支原體污染， 可以用sciencell的支原體抑制劑。在培養(yǎng)基中加入新鮮的支原體抑制劑溶液，每3-4天更換一次。一兩周內(nèi)的足以消除污染。可以有效的可以查殺各種原因感染的支原體。

　　抗生素多加對細(xì)胞無益。加抗生素的主要問題是操作不慎造成的污染未必能及時(shí)發(fā)現(xiàn)，造成后期較大的損失。

　　青鏈霉素是廣譜抑菌劑，對革蘭氏陰性和陽性細(xì)菌有抗菌性，青霉素影響細(xì)菌細(xì)胞壁合成的終末步驟，在轉(zhuǎn)肽反應(yīng)步驟一直多肽鏈的延伸;鏈霉素與核糖體的30S亞基單位結(jié)合，阻斷細(xì)菌蛋白質(zhì)的組成。比較常用 。

　　一旦細(xì)胞污染，處理辦法扔掉，查找原因，全面預(yù)防。如果細(xì)胞是經(jīng)過大量工作或高價(jià)才得到的，扔掉實(shí)在可惜，可以針對污染源加抗生素。也可以不加抗生素進(jìn)行單克隆有限稀釋至96孔板，再克隆化。

　　但是污染帶來的實(shí)驗(yàn)影響和損失不可估量，主要的是平常都要做好細(xì)胞房的管理和消毒工作。防止污染的發(fā)生。

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