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血清10099-141 2017年這個夏天如何選擇高品質(zhì),放心使用的血清?慧穎生物與您相伴,在實驗過程中助您一臂之力。
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胎牛血清FBS (fetal bovine serum):心臟穿刺的方法采血。剖腹產(chǎn)胎牛,未接觸外界,血清中的抗體補體等對細胞生長的有害成分zui少。
新生牛血清:出生24小時內(nèi)
小牛血清CS(calf serum):出生10-14天
馬血清HS(horse serum)
常用的血清廠家:GIBCO|SERANA|Bovogen|Gemini|Sigma|PAA|GE Hyclone
常用貨號:10099-141|16000-044|26140-079|10099-133|10010-147|10082-147|S-FBS-SA-015|S-FBS-AU-015|900-108|100-500|F2442|SH30084.03|SH30396.03|SH30070.03|SH30068.03等
血清的溶解與保存
1、如果不用,先放置-80 ℃保存。
2、如果要用,可于4 ℃冰箱放置過夜,再在室溫溶解。
3、溶解好的血清應(yīng)立即分裝,-80 ℃保存。
4、保存于-80 ℃的血清解凍時應(yīng)先與4 ℃冰箱放置過夜再在室溫溶解。切勿直接放在室溫溶解。
細胞傳代方法
根據(jù)細胞生長的恃點,傳代方法有3種:
1.懸浮生長細胞傳代
離心法傳代:離心(1000轉(zhuǎn)/分)去上清,沉淀物加新培養(yǎng)液后再混勻傳代。
直接傳代法:懸浮細胞沉淀在瓶壁時,將上清培養(yǎng)液去除l/2一2/3,然后用吸管直接吹打形成細胞懸液再傳代。
2.半懸浮生長細胞傳代(雜交瘤)
此類細胞部分呈現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象,但貼壁不牢,可用直接吹
打法使細胞從瓶壁脫落下來,進行傳代。
3.貼壁生長細胞傳代
采用酶消化法傳代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。
細胞冷凍保存
4.凍存液的配方是: 60%無血清培養(yǎng)液 30%血清 10% DMSO
之細胞生長減慢
提高血清濃度為15-20%;
提高接種密度;
細胞的離散度;
添加細胞生長因子;
之細胞不貼壁
胰蛋白酶消化過度;
支原體污染;
培養(yǎng)液中無貼壁因子
之細胞傳代過程中出現(xiàn)碎片、顆粒、小黑點的原因
排除細胞污染后主要有以下幾種可能:
細胞長老了,傳代時細胞已100%滿度,細胞衰老;
消化時不*,吹打過度;
血清溶解時直接從-80℃放到37 ℃或室溫;
以上資料有上海慧穎生物市場部 王麗 編輯整理
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